本发明公开一种乙酰化木质素两亲聚合物纳米胶体球及其制备方法，所述制备方法包括以下步骤：将１～５重量份碱木质素溶于２００～５００重量份冰醋酸和乙酰试剂的混合溶液，４０～６０℃水浴加热２～４小时；旋蒸除去冰醋酸后，加入２５０～９００重量份有机溶剂溶解稀释乙酰化木质素，加入１００～４５０重量份水改变微相环境，得乙酰化木质素两亲聚合物纳米胶体球。本发明方法简易，原料来源丰富廉价，生产中大量使用的冰醋酸可重复利用，生产成本低；相比较微米级无规木质素磺酸钠／壳聚糖胶束以及木质素脲醛树脂胶束，制备的乙酰化木质素两亲聚合物胶体球为均一的纳米级空心球形胶束，对农药阿维菌素的载药量高于５０％，是绿色纳米材料。