本发明属于天然高分子抗菌剂技术领域，公开了一种氨基酸改性木质素广谱抗菌剂及其制备方法与应用。本发明方法包括以下步骤：含5?50重量份木质素的碱溶液中，加入1?5重量份的醛和1?5重量份的氨基酸，40?120℃加热反应1?6h后，得到氨基酸改性木质素广谱抗菌剂。本发明还提供上述方法制备得到的氨基酸改性木质素广谱抗菌剂。本发明方法通过天然抗菌肽中活性氨基酸组分改性木质素，得到氨基酸改性木质素广谱抗菌剂，有效增强木质素的抗菌活性，使其具有高抗菌活性，抗菌性能优于木质素；同时对革兰氏阳性菌和阴性菌均具有抑制作用，具有广谱抗菌性；且毒性低，生物相容性好，在生物医药、食品和化妆品领域有着巨大的应用前景。